學術研究院
通路工具細胞
服務概述
CRISPR/Cas9系統由一個單鏈向導RNA（small guide RNA, sgRNA）和一個具有核酸內切酶功能的Cas9 蛋白組成，其技術原理包括sgRNA引導的Cas9靶向DNA切割和DNA修復兩個基本過程。CRISPR/Cas9技術的優勢是能永久性地改變基因組DNA的序列，并且可以在不編碼的DNA區域進行編輯，可以多個位置同時進行編輯。
通過Cas9基因編輯技術，對目的基因進行敲除構建的細胞株可用于基因功能研究、疾病模型構建、基因治療等方面，具有廣闊的應用前景。
服務內容
構建Cas9基因編輯細胞株。
服務流程
- 1、sgRNA設計與載體構建
包括靶基因分析、靶點設計與載體構建；
2、sgRNA篩選與CAS9/gRNA及同源重組單鏈donor轉染293細胞
3、單克隆細胞株篩選
觀察轉染熒光率，96孔板極限稀釋，24h到48h標記單克隆（GFP or RED熒光細胞），擴培后進行下一步檢測；
4、PCR檢測及測序驗證
提取基因DNA，PCR擴增敲除靶點附近的基因組序列，并通過測序鑒定陽性敲除克隆。
5、目的細胞擴培與保種
6、交付實物
目的基因敲除細胞的單克隆細胞系：1到2*10^6個cells。 -
Cas9基因編輯細胞株流程示意圖
服務優勢
- 1、一站式服務
提供一站式CRISPR/Cas9基因敲除及點突變細胞株構建服務，省事省心；
2、質量保障
保證細胞株無支原體衣原體感染；
3、技術指導
提供專業培養和Cas9技術指導；
4、售后無憂
發貨細胞2周無責售后，無后顧之憂；KO細胞為客戶長期保存。
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